Terapia Génica para Hipertensión Arterial

 

Tipo: Terapia genética en células somáticas (células endoteliales) ex vivo.

Gen a tratar: Inhibir gen para receptores AT-1, AT-2.

Vector: Virus no patógeno al hombre (adenovirus  adenoasociados)

Estrategia: Vector viral en ratas.

Procedimiento: Una vez cargado el vector viral se puede administrar por vía intravenosa o por inhalación y así llegar a la intimidad del vaso, microcirculación y órganos per fundidos.

Por pasos de endocitosis, liberación intracelular de oligonucleótidos de contra sentido, integración genética, impresión del mensaje por el ADN en el ARNm e interpretación  microsomal del mensaje, se llega a producir la supresión de síntesis proteica (supresión de síntesis de receptores AT-1 para angiotensina ll).

Resultado: Se observa que la administración de oligonucleótidos de contra sentido para reducir la síntesis de ECA (enzima convertidora de angiotensina)

Y también reducir la síntesis de receptores AT-1, impiden el desarrollo de hipertrofia ventricular en las ratas hipertensas.

Bibliografía: http://www.fac.org.ar/tcvc/llave/c075/pastelin.htm

Ejemplo de Transgénico

POTENCIAL ANTIHIPERTENSIVO DE BIOAMARANTINA RECOMBINANTE EXPRESADA EN HOJAS DE TABACO TRANSGÉNICO

Numerosas investigaciones han concluido que los efectos de la HTA, pueden ser prevenidos o disminuidos a través de la ingesta de alimentos que tengan compuestos con una actividad fisiológica benéfica en el organismo, como es el caso de determinados péptidos bioactivos cuya actividad antihipertensiva ha sido documentada. En este sentido, la amarantina, principal proteína de reserva del grano de amaranto, cuyas excelentes cualidades nutricionales y su gran plasticidad para ser modificada a través de ingeniería de proteínas han sido demostradas en numerosos estudios, fue recientemente modificada incorporándole en la estructura primaria, de su subunidad ácida, una secuencia repetitiva (4x) del péptido bioactivo VY, cuya capacidad de inhibición de la principal proteína de regulación de la presión arterial (Enzima Convertidora de Angiotensina, ECA), ha sido demostrada; tras esta modificación, esta proteína se denominó “bioamarantina”

Se muestra que la incorporación del péptido bioactivo VY en la estructura de la amarantina, logró incrementar su capacidad antihipertensiva basal hasta 3.5 veces

Los resultados  permiten posicionar a la bioamarantina como una excelente candidata para ser incorporada en el fruto u hojas comestibles de cultivos de interés alimentario, proporcionándoles con ello un potencial empleo en el tratamiento de la HTA.

 

BIBLIOGRAFIA:

http://www.smbb.com.mx/congresos%20smbb/acapulco09/TRABAJOS/AREA_III/OIII-16.pdf

Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza

Es un tipo de ADN  formado por la unión de dos moléculas  de diferente origen.Se distingue entre el ADN recombinante natural, y el ADN recombinante sintético. El primero es el que se genera de manera biológica dentro de los organismos. El ADN se recombina de manera natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral.

Los virus transfieren ADN entre bacterias y entre especies eucariotas, los virus, que son poco más que material genético envuelto en una cubierta con proteínas, transfieren su material genético durante la infección. Dentro de la célula infectada, los genes se replican y dirigen la síntesis de proteínas virales. Los genes replicados y las nuevas proteínas virales se ensamblan dentro de la célula y forman nuevos virus que, a su vez, son liberados para infectar a otras células. Por lo general, un virus determinado solo infecta y se replica en las células de ciertas especies bacterianas, animales o vegetales. Durante muchas infecciones virales, las secuencias del ADN viral se incorpora a uno de los cromosomas de la célula huésped. Este ADN puede permanecer ahí durante días, meses o incluso años. Cuando se producen nuevos virus a partir del ADN incorporado, estos pueden integrar por error genes humanos en el genoma del virus; de este modo se crea un virus recombinante.

BIBLIOGRAFIA:

http://books.google.com.ec/books?id=uO48-6v7GcoC&pg=PA244&lpg=PA244&dq=adn+recombinante+natural+en+animales&source=bl&ots=vVqAHR1OZy&sig=9Es5OgTCTqM5nGAMMrOTuQ61gpU&hl=es&sa=X&ei=RS6gUPv3FIKQ9QSQwIDYCg&ved=0CCgQ6AEwAg#v=onepage&q=adn%20recombinante%20natural%20en%20animales&f=false

Tècnica de hibridación o una de secuenciación

La técnica de hibridación in situ se basa en la capacidad que tienen los fragmentos de ácido nucleico de cadena sencilla de unirse a otros fragmentos de ácido nucleico de cadena sencilla cuya secuencia sea complementaria. 
Este proceso de hibridación puede hacerse de diferentes formas como en cortes de tejidos o en embriones, denominándose en este caso, hibridación in situ en whole mount.











Este proceso consiste en utilizar un fragmento de ácido nucleico (sonda de ARN) para identificar la presencia en las células o tejidos de la correspondiente secuencia complementaria. En función del método de marcaje del fragmento utilizado para la hibridación, el resultado puede visualizarse por diferentes métodos, siendo el más habitual en biología del desarrollo la obtención de un precipitado coloreado. 


BIBLIOGRAFÍA:
www.cnic.es/doc/otri/catalogo_capacidades_es.pdf

Artículo relacionado con HTA

Objetivo:

Muestra Biológica:

Extracción:

Gen a Amplificar:

Tipo de PCR:

Desnaturalización:

Hibridación:

Extensión:

Numero de ciclos:

Vizualización:

PCR en HTA

Se utiliza  PCR para la determinación de los polimorfismos I/D del gen de la enzima conversiva de la angiotensina (ECA), A-6G y M235T del gen del angiotensinógeno y A1166C del gen del receptor AT1 de la angiotensina II.
 No hubo diferencias en las distribuciones genotípicas ni alélicas entre casos y controles. En hipertensos tampoco hubo diferencias al comparar genotipos y distribución alélica según terciles de valores de presión arterial o presencia/ausencia de antecedentes familiares de HTA. Sólo en mujeres se detectó un mayor riesgo de hipertensión en las pacientes con haplotipos que contenían el alelo C del polimorfismo A1166C con los alelos A del polimorfismo A-6G (p = 0,007) o T del polimorfismo M235T (p = 0,007).

BIBLIOGRAFÍA:
http://www.elsevier.es/es/revistas/medicina-clinica-2/polimorfismos-geneticos-sistema-renina-angiotensina-e-hipertension-arterial-13020911-originales-2001

Relación de la Traducción con la Hipertensión Arterial

En el año 2005, BRIGHT, buscó asociaciones entre la presencia de HTA y polimorfismos del gen WNK1, responsable del síndrome de Gordon, enfermedad autosómica recesiva, caracterizada por pseudohiperaldosteronismo tipo II e HTA, donde WNK1 regula la recaptación de Na+ y Cl- en las porciones distales del nefrón. Se estudiaron pacientes hipertensos sin el síndrome, observando que no existía relación entre polimorfismos para WNK1 y la presencia de HTA, pero sí en la severidad de ésta cuando estaba presente.

• Para HTA sistólica: 

El con mayor poder de asociación fue el polimorfismo en 10q24, próximo a CYP17A1, perteneciente a la familia del citocromo P450, que codifica para una enzima participante en la vía de los mineralocorticoides.

• Para HTA diastólica: 

La señal más fuerte fue en el polimorfismo de rs1378942 ubicado en el intrón de CSK (c-src tirosinquinasa) en 15q24. En esta región se encuentran además los genes CYP1A2, pertenecientes a la familia de los citocromos P450, relacionados al metabolismo de la cafeína, LMAN1L codifca para una proteína participante en el transporte intracelular y ARID3B codifica para una proteína que se une a sitios ricos en AT en el ácido desoxirribonucleico (ADN), siendo su mutación letal en períodos embrionarios. El segundo SNP es rs16998073, ubicado en 4q21, próximo a FGFR5, perteneciente a la familia de receptores fibroblásticos, que estimula el crecimiento de diversos tipos celulares, incluyendo células miocárdicas y endoteliales.

Más factores genéticos sobre la Hipertensión arterial los encontraras aquí:
http://www.scielo.org.pe/pdf/afm/v71n4/a04v71n4.pdf

Bibliografía:
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-98872010000600016